BioBond™ Adhesivo tisular

Hoja de datos técnicos

Adhesivo de sección tisular
Para química inmunotisular, la elección de preparación de espécimen es crítica para la preservación de antígenos en la muestra. De gran importancia en los programas de preparación, son la fijación e incrustación de especímenes. El protocolo debe satisfacer los requerimientos para la preservación de la integridad y antigenicidad estructurales.

¿Por qué portaobjetos recubiertos?
Habiendo preparado el espécimen de tejido para el inmuno-etiquetado, es entonces imperativo realizar las incubaciones con un protocolo diseñado para maximizar la señal específica y reducir al mínimo el fondo. Algunas condiciones de incubación pueden hacer que secciones de tejido sean removidas del portaobjetos de vidrio. Adhesivos típicos de sección de tejido, como poly-L-Lysine, goma de Elmer, cromo-alum, etc., no son adecuados para usarse con etiquetado inmuno-oro, debido al fondo incrementado producido por la atracción de partículas de oro al adhesivo en el portaobjetos.

Adicionalmente, la superficie de los portaobjetos de vidrio es irregular y es activada por la estructura tetraédrica del silicio. Por tanto, suministra sitios activos para absorción de proteínas o reacciones con químicos y reactivos. Por lo tanto, es importante reducir al mínimo esta posibilidad, recubriendo la superficie con un material que sea de baja reactividad con los reactivos. BioBond™ produce una adhesión muy fuerte entre el vidrio y la sección del tejido para incubaciones subsecuentes. BioBond™ recubre el portaobjetos de vidrio con una capa protectora para reducir al mínimo la interacción de la superficie de vidrio cargada con reactivos. Esto es también de particular importancia para la capacidad de reproducción de los resultados debido a las variaciones que ocurren entre los portaobjetos de vidrio obtenidos de fuentes diferentes y en diferentes países. Esto es particularmente efectivo para usarse bajo condiciones severas de incubación como cuando se usan en hibridización in situ.

Procedimiento simple de recubrimiento
Con BioBond™ no hay procedimientos complicados para el recubrimiento de portaobjetos. El protocolo siguiente recubrirá 1000 ó más portaobjetos. Use guantes de hule desechables cuando manipule BioBond™.

1. Cargue con portaobjetos los soportes (de metal o de plástico). Un soporte de 25 al mismo tiempo, es de lo más conveniente.
2. Coloque los soportes en una solución al 2% de detergente Decon y deje remojando durante 1 hora para limpiarlos.
3. Enjuague cuidadosamente con agua corriente para remover todas las trazas de Decon. Si el agua corriente local no es limpia o muy dura, use entonces agua destilada.
4. Seque al aire los portaobjetos o a 40°C. Tape para proteger del polvo.
5. Prepare una solución al 2% de BioBond™ en acetona (2ml en 100ml). Será suficiente un reactivo de uso general.
6. Sumerja el soporte en una solución de BioBond™ durante 4 minutos.
7. Enjuague durante 5 minutos con agua corriente limpia o con agua destilada.
8. Seque al aire.
9. Una vez que los portaobjetos estén completamente secos, almacene en un ambiente libre de polvo hasta que se necesiten (generalmente en la caja original de los portaobjetos).
Los portaobjetos están entonces listos para las secciones de montaje. Se pueden almacenar indefinidamente. Con este método, una solución de 100ml al 2% de BioBond™ recubrirá al menos 100 portaobjetos.

BioBond™ es adecuado para todos los tipos de especímenes de tejido incluyendo cera de parafina o secciones de resina, centrifugados de célula o secciones congeladas. BioBond™ se suministra en volúmenes de 20ml unidades, suficientes para recubrir al menos 1000 portaobjetos.

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