El Wet Cell Kit™ de SPI para SEM, está ahora disponible para quienes quieren llevar a cabo imagenología por retrodispersión de electrones de muestras húmedas, pero que no tienen los fondos para comprar un SEM de alto costo, con capacidad para ser operado al bajo vacío. De hecho creemos que el Wet Cell Kit™ de SPI para SEM se puede utilizar con bastante éxito en cualquier SEM, que no necesita tener capacidades LaB6 o FESEM (Microscopía Electrónica de Barrido de Emisión de Campo). Los resultados mostrados en esta página hechos en un SEM, que en forma definitiva no era nuevo y que sólo se equipó con un filamento de tungsteno calentado.
Las células pueden hacerse crecer sobre una membrana, justo como lo hacen sobre la superficie de ciertos polímeros como el Aclar®, el policarbonato, etc. Una vez que las células son procesadas (esto es, fijadas) y lavadas, se puede pegar otra célula a la primera creando una cámara que tenga el volumen de dos rejillas de ventana con membrana. Pero puesto que este es de hecho un volumen mayor de lo que realmente se necesita, en su lugar se puede pegar la parte de atrás de un disco de silicio vacío. El sello por supuesto debe ser apto para su uso con vacío.
¡Nada menos que espectacular! La ventana con membrana de nitruro de silicio es más delgada que una membrana de polímero, lo cual constituye la razón por la que los resultados son tan espectaculares, cuando se les compara con los que se obtienen utilizando sistemas que emplean membranas de polímero.
Todos los resultados de esta página web fueron de células Cos 7 crecidas sobre rejillas de ventana con membrana de nitruro de silicio de 100 nm de espesor, específicamente la SPI #4122SN-BA.
Las células fueron crecidas a 37°C (98.6° F) en una cámara incubadora que consistía en un cilindro de aluminio con filamentos en la parte interior, y pegadas con époxico a las membranas. El material aluminio fue recubierto en carbón antes de adherir la membrana. Las células se fijaron después en glutaraldehido y OsO4 lavando minuciosamente con amortiguador de fosfato después de cada paso. Se añadieron veinte micro litros de amortiguador (buffer) de fosfato con carga de dextrano y se selló la celda de ventana con membrana de nitruro de silicio.
Para esta aplicación, más delgado definitivamente es mejor. Ente más delgada sea la membrana, la resolución será mayor. Las micrografías tomadas para la presentación en el sitio web, las hicimos utilizando membranas de 100 nm; pero no hay duda a nuestro parecer, que si se hubieran elegido membranas más delgadas, estaría disponible bastante más información a partir de las imágenes, que serían de una resolución ostensiblemente mayor. A capa más delgada, mejor calidad de los datos; pero también, entre más delgada sea la capa, es más probable que uno la pueda romper. Por lo tanto, ofrecemos los Kits de celda húmeda en una variedad de diferentes espesores de membrana y dejamos que nuestros clientes decidan cuál es el mejor para ellos. También ofrecemos un kit "muestrario" que incluye 2 de cada una de cuatro diferentes espesores de membrana (o sea: 100 nm, 50 nm, 30 nm y 20 nm) más 8 ""blanks"", de tal manera que exista suficiente material para preparar un total de 8 diferentes celdas húmedas.
En lugar de usar como "respaldo" otra rejilla de ventana con membrana, recomendamos usar un blank de silicio. Esta es literalmente una pieza de silicio de una oblea del mismo espesor pero sin el agujero u hoyo desbastado. Por tanto, cuando manipule la celda, necesita usted preocuparse de no tocar solamente uno de los dos lados. El utilizar un blank, deviene en un sistema mucho más robusto y que es mucho menos probable de romperse cuando se esté manipulando o procesando.
En teoría, se puede utilizar una amplia gama de distintos adhesivos, incluyendo nuestro pegamento epóxico 5-minute, para pegar los dos diferentes lados de silicio, siendo uno de ellos la rejilla de ventana con membrana y el otro, un blank de silicio, Pero recomendamos uno en particular para este propósito, el SPI # 6000WCG-AB, puesto que es mucho más apto para ser usado con alto vacío. Una unidad de este adhesivo, más que suficiente para pegar diez celdas, va incluida en cada kit.
Cada kit contiene diez rejillas de membrana de los espesores mencionados, más 10 blanks, para preparar un total de 10 diferentes celdas húmedas SEM; más un paquete de adhesivo especial DP 460 de la marca 3M®, para pegar uniendo los dos lados de la celda.
Adhesivo especial para unir pegando las los mitades y preparar un sello compatible con UHV.
